薯蓣皂苷对TGF-β1诱导HK-2细胞转分化的影响
目的:观察薯蓣皂苷对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化(EMT)的作用,并探讨其可能的作用机制。方法:HK-2细胞中分别加入0、1.25、2.5、5、10μmol/L薯蓣皂苷干预48 h后,CCK-8法检测细胞存活率,选取对HK-2细胞无毒性的浓度进行后续试验;将HK-2细胞随机分为空白对照组、模型对照组、薯蓣皂苷1.25、2.5、5μmol/L组、氯沙坦1μmol/L组,药物干预48 h后,ELISA法检测细胞上清液中纤连蛋白(FN)、I型胶原蛋白(Col-I)的含量;划痕法检测细胞迁移能力;鬼笔环肽染色法检测细胞骨架形态变化;qRT-PCR法及Western blot法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(Asma)、E-钙黏蛋白(Ecadherin)、Ras同源基因家族成员A(Rhoa)、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(Rock1)mRNA及蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型对照组细胞迁移距离、细胞上清液中FN、Col-I含量、丝状肌动蛋白(F-actin)荧光强度显著升高,细胞中Asma、Rhoa、Rock1 mRNA及蛋白表达显著上调(P0.01),Ecadherin mRNA及蛋白表达显著下调(P0.01);与模型对照组比较,薯蓣皂苷各组细胞迁移距离、细胞上清液中FN、Col-I含量、F-actin荧光强度明显降低,细胞中Asma、Rhoa、Rock1 mRNA及蛋白表达明显下调(P0.05或P0.01),E-cadherin mRNA及蛋白表达明显上调(P0.05或P0.01)。结论:薯蓣皂苷可通过抑制RhoA/Rock1途径的激活,调节细胞骨架重构,从而发挥抑制EMT的发生发展,减少细胞外基质(ECM)生成的作用。
中药药理与临床
2025年04期
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