目的:探讨大黄灵仙方调控IL-2/STAT5信号通路对肝内胆管炎症模型大鼠Th17/Treg细胞平衡的影响。方法:采用随机数字表法将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、胆宁片0.5 g/kg组、大黄灵仙方2.4、4.8 g/kg组,每组10只。造模大鼠在胆总管一次性注射LPS 1.25 mg/kg构建大鼠肝内胆管炎症动物模型。造模成功后各组分别灌胃给予相应浓度药物,正常对照组、模型对照组予等体积生理盐水灌胃,1次/d,连续7 d。HE染色观察肝组织病理变化程度;微板法测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)的含量;ELISA法检测血清中白介素-2(IL-2)、IL-6、IL-10、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;Western blot法检测胆管组织中IL-2、STAT5、p-STAT5蛋白表达;RT-qPCR法检测胆管组织中的Il2、Stat5 mRNA的表达;流式细胞术检测外周血和脾脏CD4、辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)水平,计算Th17/Treg比值。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠的肝窦、胆管细胞变性增生,胆小管严重淤血扩张,汇管区周围存在大量炎性细胞浸润,血清中ALT、AST、TBil、DBil、IL-6、IL-17、TNF-α活力或含量明显升高,胆管STAT5、p-STAT5蛋白表达上调及Stat5 mRNA表达上调(P0.01),血清中IL-2、IL-10含量及胆管Il2、Stat5 mRNA表达下调(P0.01),大鼠外周血和脾脏中CD4、Treg细胞数量减少,Th17细胞数量增加,且Th17/Treg比值显著升高(P0.01);与模型对照组比较,胆宁片组0.5 g/kg、大黄灵仙方2.4、4.8 g/kg的大鼠肝脏病理损伤程度均有改善,极少见细胞坏死及淤血扩张,血清中ALT、AST、TBil、DBil、IL-6、IL-17、TNF-α活力或含量升高(P0.05或P0.01),胆管STAT5、p-STAT5蛋白表达下调,Stat5 mRNA表达下调(P0.05或P0.01),Il2、Stat5 mRNA的表达上调,血清中IL-2、IL-10含量升高,大鼠外周血和脾脏中CD4、Treg细胞数量增加,Th17细胞数量减少,且Th17/Treg比值降低(P0.05或P0.01),其作用呈剂量依赖关系,以大黄灵仙方4.8 g/kg组效果最佳(P0.05或P0.01)。结论:大黄灵仙方可通过抑制IL-2/STAT5信号通路活化,维持肝内胆管炎症模型大鼠Th17/Treg细胞亚群平衡,从而抑制炎症因子的释放,促使胆道恢复至非炎症状态,起到防治肝内胆管结石的作用。