目的 构建一种基于重组流感病毒血凝素（haemagglutinin， HA）、重组神经氨酸酶（neuraminidase， NA）和重组基质蛋白（matrix protein 1， M1）的病毒样颗粒（virus-like particle， VLP），制备并评价其作为通用流感VLP疫苗的可行性。方法 设计生成马赛克神经氨酸酶（mosaic neuraminidase， mNA）基因序列，将其与流感病毒马赛克血凝素（mosaic haemagglutinin， mHA）基因序列和M1基因序列分别插入pFastBac 1载体，得到相应重组供体，转化至DH10感受态中，提取重组质粒并转染昆虫细胞获得包含目的基因的重组杆粒。将重组杆粒感染昆虫细胞进行蛋白表达与VLP组装，纯化VLP后用于小鼠免疫，判断其免疫原性与诱导能力。结果 成功构建了包含mHA、mNA和M1共3种目的基因的重组杆粒。mNA在昆虫细胞中成功表达。纯化后的样品在透射电子显微镜下观察到明显的球状结构、直径在100 nm左右的VLPs；动态光散射（dynamic light scattering， DLS）实验证明VLPs粒径分布均匀。制备的流感VLPs免疫小鼠后可以诱导小鼠血清抗体效价以及小鼠脾脏免疫细胞占淋巴细胞比率增高（P均＜0.05）。结论 mHA、mNA和M1 3种蛋白在昆虫细胞中成功表达并组装形成VLPs，VLPs在小鼠体内可以诱导产生较好的体液免疫和细胞免疫反应。该形式的VLPs有进一步开发成为通用流感疫苗的可行性。