不同物种MPG蛋白介导水稻A-to-K碱基编辑
为进一步优化植物腺嘌呤碱基颠换编辑工具,对不同来源的N-甲基嘌呤DNA糖基化酶(MPG,或称AAG)介导的植物腺嘌呤碱基颠换编辑工具pAKBE进行碱基编辑活性测试,获得具腺嘌呤碱基颠换编辑活性的MPG.通过农杆菌介导的水稻稳定遗传转化实验,首先探究鼠源mAAG的多种突变体在水稻中的A-to-K(K=G/T)编辑能力并逐步得到最佳变体mAAGv3-EF(A-to-T的编辑效率为9.37%),再将mAAG中的变异位点引入人源hMPG形成hMPGv3-EF,结果发现该突变体的编辑效率未有明显提升(A-to-T的编辑效率为10.00%).进一步还获得水稻内源OsMPG及其突变体OsMPG-N169S并证实它们具有A-toK编辑能力.综合分析发现三种来源的N-甲基嘌呤DNA糖基化酶介导的植物腺嘌呤碱基颠换编辑工具均具有A-to-K编辑活性,这为未来植物腺嘌呤碱基颠换编辑的深入优化工作奠定一定基础.
四川大学学报(自然科学版)
2025年01期
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